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便攜式熒光定量PCR檢測(cè)儀以確保數(shù)據(jù)可靠?

更新時(shí)間:2025-06-20      點(diǎn)擊次數(shù):714

  【BK-PCR16D】山東博科儀器以客戶為中心,以服務(wù)為宗旨,以創(chuàng)新為動(dòng)力。

  儀器使用前的準(zhǔn)備

  儀器校準(zhǔn)

  定期對(duì)便攜式熒光定量PCR檢測(cè)儀進(jìn)行校準(zhǔn)是確保數(shù)據(jù)可靠的基礎(chǔ)。校準(zhǔn)過(guò)程要嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,通常需要使用標(biāo)準(zhǔn)品或質(zhì)控品。比如,使用已知濃度的核酸標(biāo)準(zhǔn)品,按照檢測(cè)流程進(jìn)行操作,記錄儀器檢測(cè)出的結(jié)果,與標(biāo)準(zhǔn)品的實(shí)際濃度進(jìn)行對(duì)比。如果檢測(cè)結(jié)果與實(shí)際濃度偏差較大,就需要對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)整,直至檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

  校準(zhǔn)周期應(yīng)根據(jù)儀器的使用頻率和環(huán)境條件來(lái)確定。如果儀器使用頻繁,或者處于高溫、高濕等惡劣環(huán)境中,校準(zhǔn)周期應(yīng)適當(dāng)縮短,一般建議每月進(jìn)行一次校準(zhǔn)。

  試劑與耗材檢查

  確保使用的試劑在有效期內(nèi),且保存條件符合要求。例如,熒光定量PCR試劑通常需要在-20℃或-80℃冰箱中保存,運(yùn)輸過(guò)程中也要使用干冰等保持低溫。使用前要檢查試劑的外觀,如有渾濁、沉淀或變色等情況,應(yīng)停止使用。

  耗材如反應(yīng)管、移液器槍頭等要保證無(wú)菌、無(wú)污染。使用前可對(duì)反應(yīng)管進(jìn)行外觀檢查,確保無(wú)破損、無(wú)變形。同時(shí),要使用與儀器配套的耗材,以保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

  樣本采集與處理

  規(guī)范樣本采集

  樣本采集是影響檢測(cè)結(jié)果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以采集血液樣本為例,要選擇合適的采血部位和采血方法。一般可選擇前腔靜脈或耳靜脈采血,使用一次性無(wú)菌注射器和采血管。采血過(guò)程中要避免溶血,因?yàn)槿苎獣?huì)釋放出血紅蛋白等物質(zhì),干擾PCR反應(yīng)。

  對(duì)于其他類型的樣本,如組織、唾液等,也要按照相應(yīng)的規(guī)范進(jìn)行采集。采集組織樣本時(shí),要選取病變明顯的部位,避免采集到壞死組織;采集唾液樣本時(shí),要讓被采集者充分漱口,減少食物殘?jiān)涂谇患?xì)菌的干擾。

  正確處理樣本

  采集到的樣本要及時(shí)進(jìn)行處理,防止樣本中的核酸降解。對(duì)于血液樣本,一般需要進(jìn)行離心分離血清或血漿;對(duì)于組織樣本,要進(jìn)行研磨、勻漿等處理,釋放出其中的核酸。

  在樣本處理過(guò)程中,要注意防止交叉污染。使用不同的樣本處理工具,如移液器、離心管等,避免樣本之間的相互污染。同時(shí),操作人員要佩戴手套、口罩等防護(hù)用品,防止自身攜帶的微生物污染樣本。

  檢測(cè)過(guò)程控制

  嚴(yán)格操作流程

  按照儀器說(shuō)明書(shū)和試劑盒的操作流程進(jìn)行檢測(cè),不得隨意更改步驟或參數(shù)。例如,在PCR反應(yīng)體系中,要準(zhǔn)確加入樣本、試劑和引物探針,控制好反應(yīng)體系的體積和濃度。反應(yīng)溫度和時(shí)間也要嚴(yán)格按照要求設(shè)置,如變性溫度一般為95℃左右,退火溫度根據(jù)引物的Tm值確定,延伸溫度一般為72℃左右。

  在加樣過(guò)程中,要使用精確的移液器,確保加樣量準(zhǔn)確。加樣時(shí)要小心操作,避免產(chǎn)生氣泡,因?yàn)闅馀輹?huì)影響PCR反應(yīng)的進(jìn)行。

  設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)

  在每次檢測(cè)中,都要設(shè)置陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照。陰性對(duì)照使用不含目標(biāo)核酸的樣本,用于檢測(cè)試劑和操作過(guò)程中是否存在污染;陽(yáng)性對(duì)照使用已知濃度的目標(biāo)核酸樣本,用于驗(yàn)證檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏度和準(zhǔn)確性;空白對(duì)照使用不含樣本和試劑的反應(yīng)體系,用于檢測(cè)儀器和環(huán)境的本底信號(hào)。

  如果對(duì)照實(shí)驗(yàn)的結(jié)果不符合要求,如陰性對(duì)照出現(xiàn)陽(yáng)性信號(hào),說(shuō)明檢測(cè)過(guò)程中存在污染,需要重新進(jìn)行檢測(cè)。

  儀器維護(hù)與保養(yǎng)

  日常清潔

  每次使用完便攜式熒光定量PCR檢測(cè)儀后,要及時(shí)進(jìn)行清潔。用柔軟的干布擦拭儀器表面,去除灰塵和污漬。對(duì)于儀器的光學(xué)部件,如光源、檢測(cè)器等,要使用專用的鏡頭紙或無(wú)塵布輕輕擦拭,避免刮傷。

  定期清理儀器的散熱孔和風(fēng)扇,防止灰塵堵塞,影響儀器的散熱效果。可以使用吸塵器或小毛刷進(jìn)行清理。

  定期維護(hù)

  定期對(duì)儀器進(jìn)行全面的維護(hù)和檢查,如檢查儀器的電源、線路是否正常,儀器的各個(gè)部件是否松動(dòng)或損壞等。如果發(fā)現(xiàn)儀器存在問(wèn)題,要及時(shí)聯(lián)系專業(yè)維修人員進(jìn)行維修。

  按照儀器說(shuō)明書(shū)的要求,定期對(duì)儀器進(jìn)行性能測(cè)試和校準(zhǔn),確保儀器始終處于良好的工作狀態(tài)。


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